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      TEV重組型蛋白酶相關小知識

      發表時間:2021-04-06  |  點擊率:1279
         蛋白酶是催化蛋白質水解的一類酶,是酶學研究中較早也是最深入的一種酶。重組TEV蛋白酶(GST標簽)是煙草花葉病毒小核體蛋白a催化結構域基因編碼的經高度純化的制劑,該酶的生物學功能是在病毒產生過程中將多蛋白體酶解為單一蛋白。
        和因子Xa、凝血酶相比,TEV酶是識別序列更加嚴格。做為生物工程下游技術中融合蛋白酶切使用的重要工具酶,TEV酶識別非常一致的7氨基酸序列:E-Xaa-Xaa-Y-Xaa-Q-P1’(G/S),酶切發生在Q和P1’之間的肽鍵。常用的7氨基酸序列是ENLYFQG。P1’位置可以是不同的小分子氨基酸,這樣目標蛋白從融合蛋白的N端釋放,帶自然的N末端或者只多一個氨基酸的蛋白。該產品是經過了基因工程改造的蛋白酶,穩定性好,在廣泛的溫度范圍具有特異性。本品來源于重組大腸桿菌,經過高度純化,比活性達到10,000U/mg。最適酶切溫度是30℃,但在4℃也具有酶活性。rTEV-H帶His標簽,酶切后可方便地通過谷胱甘肽親和柱層析去除。酶切的條件比如:溫度、pH、DTT等可根據具體蛋白進行優化。
        活性單位:
        一個酶活性單位定義為在4℃,pH8.0條件下,12~16小時在酶切反應緩沖液中將5μg融合蛋白95%酶切所需要的酶量。

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